एंजाइमेटिक ऊतक पाचन तकनीक - क्रूड कोलेजनेज़ से लेकर उच्च शुद्धता वाले पाचन उत्पादों तक

कोलेजनेज़, जो आमतौर पर एंजाइमेटिक ऊतक पाचन में उपयोग किया जाता है, विशेष रूप से कोशिका सतह संरचना की अखंडता को नुकसान पहुंचाए बिना कोलेजन और फ़ाइब्रोनेक्टिन के नेटवर्क को अलग करते हुए, बाह्य कोशिकीय कोलेजन को ख़राब करता है। बाह्यकोशिकीय मैट्रिक्स की जटिल संरचना के कारण, कोलेजन के अलावा, इसमें इलास्टिन और ग्लाइकोप्रोटीन जैसी अन्य मैक्रोमोलेक्यूलर संरचनाएं भी शामिल होती हैं। इसके अलावा, विभिन्न ऊतक प्रकार, विभिन्न प्रजातियों के स्रोत और विभिन्न आयु समूहों में अलग-अलग बाह्य मैट्रिक्स घटक होते हैं। इसलिए, वाणिज्यिक कोलेजनेज़ उत्पाद आम तौर पर क्लोस्ट्रीडियम लाइसेट लाइसेट का कच्चा अर्क होता है, जो कोलेजनेज़ और ट्रिप्सिन जैसे प्रोटीयोलाइटिक एंजाइमों का मिश्रण होता है, जो कोलेजन और अन्य प्रोटीन और पॉलीसेकेराइड जैसे बाह्य कोशिकीय मैक्रोमोलेक्यूलर पदार्थों को ख़राब कर सकता है। विभिन्न प्रकार के ऊतकों में पाचन संबंधी अनुप्रयोग।

हालांकि, विभिन्न प्रयोगात्मक अध्ययनों में अलग किए गए विशिष्ट ऊतकों के लिए, अनुभव के अनुसार उपयुक्त कोलेजनेज़ उत्पादों का चयन करना और सर्वोत्तम पाचन योजना खोजने के लिए एंजाइम एकाग्रता, एंजाइम मात्रा और एंजाइम कार्रवाई समय का पता लगाना आवश्यक है।

रोश कोलेजनेज़ उत्पाद चयन उदाहरण

रोश कोलेजनेज़ उत्पाद को क्लोस्ट्रीडियम हिस्टोलिटिकम से निकाला जाता है और विभिन्न एंजाइम गतिविधियों और सत्यापित कार्यात्मक अनुप्रयोगों के अनुसार कोलेजनेज़ ए/बी/डी/पी/एच में वर्गीकृत किया जाता है। इसका व्यापक रूप से फेफड़े, हृदय, मांसपेशियों, हड्डी, वसा ऊतक, यकृत, गुर्दे, उपास्थि, स्तन, प्लेसेंटा, रक्त वाहिकाओं, मस्तिष्क ऊतक और ट्यूमर ऊतक जैसे विभिन्न ऊतकों में एकल कोशिकाओं को अलग करने में उपयोग किया जाता है। एप्लिकेशन द्वारा प्राप्त सेल उपज, गतिविधि और सेल फ़ंक्शन सख्त उत्पाद गुणवत्ता नियंत्रण और सत्यापन के अधीन हैं।

सुझावों:

यदि आपका ऊतक एंजाइमेटिक पाचन और फैलाव की प्रक्रिया में है, तो जिलेटिनस आसंजन कोशिकाएं दिखाई देती हैं, जो कोशिका के फैलाव को प्रभावित करती हैं। यह संभवतः टूटी हुई कोशिकाओं में बाह्यकोशिकीय स्थान में छोड़े गए डीएनए के आसंजन के कारण होता है। DNase को जोड़कर कोशिकाओं का आसंजन प्राप्त किया जा सकता है। बेहतर फैलाव.

चूँकि कोलेजनेज़ क्रूड एंजाइम में एमाइलेज़ और लाइपेज जैसे विभिन्न प्रोटीज़ भी होते हैं, यह कोशिका की सतह पर प्रोटीन को भी पचाता है, जिससे कोशिकाओं को कुछ नुकसान होता है। इसके अलावा, क्रूड कोलेजनेज़ बैचों में लगातार गुणवत्ता और एंजाइम गतिविधि को बनाए नहीं रखता है। भले ही आप एक ही ऊतक में पाचन के लिए कोलेजनेज़ के विभिन्न बैचों का उपयोग करते हैं, फिर भी आपको एंजाइम एकाग्रता, एंजाइम मात्रा और एंजाइम कार्रवाई समय को अनुकूलित करने की आवश्यकता होती है।

तो आप अपने संगठन को कम प्रयास में प्रयोग को पचाने में कैसे सक्षम बनाते हैं?

रोश ^{डिस्पेज़®} उत्पाद

Roche ^{Dispase® का} उपयोग विभिन्न प्रकार के ऊतकों और अंगों में प्राथमिक कोशिका तैयार करने के लिए किया जा सकता है। अपनी हल्की प्रकृति के कारण, यह पाचन के दौरान कोशिकाओं को न्यूनतम नुकसान पहुंचा सकता है। इसका उपयोग कोशिकाओं के उपसंस्कृति और कोशिका निलंबन के लिए भी किया जा सकता है। तरल पदार्थ में मौजूद एग्लोमेरेट्स पचते हैं और डीपोलीमराइज़ होते हैं। ^{डिस्पेज़®} माइकोप्लाज्मा संदूषण की संभावना को खत्म करने के लिए बैसिलस पॉलीमेक्सा से निकाला गया एक शुद्ध तटस्थ प्रोटीज़ है और इसमें पीएच और तापमान स्थितियों की एक विस्तृत श्रृंखला के तहत अच्छी स्थिरता है, इसलिए यह ऊतक पाचन की प्रक्रिया में है। कोलेजनेज़ की तुलना में प्रदर्शन अधिक स्थिर है।

डिस्पेज़ ^® रोश ने एपिडर्मिस और त्वचा कोशिकाओं में विशेष पृथक्करण किया, अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला में सुसंस्कृत कॉर्टिकल ऊतक प्राप्त किया। ^Dispase® I और ^Dispase® II के बीच का अंतर शुद्धता में अंतर है। डिस्पेज़ ^® I फ़िल्टर-स्टरलाइज़्ड है और डिस्पेज़ ^® I की प्रति मिलीग्राम शुद्धता और एंजाइम गतिविधि डिस्पेज़ ^® II की तुलना में बहुत अधिक है।

रोश हाई प्योरिटी रिसर्च लेवल एंजाइम मिक्स लिबरेज़ रिसर्च ग्रेड एंजाइम ब्लेंड्स

लिबरेज़ रिसर्च ग्रेड एंजाइम ब्लेंड्स में एंजाइम मिश्रण की एक श्रृंखला होती है जिसमें तटस्थ प्रोटीज़ (गैर-क्लोस्ट्रीडियम प्रोटीज़) और उच्च शुद्धता वाले कोलेजनेज़ I + कोलेजनेज़ II के विभिन्न अनुपातों का मिश्रण होता है। अधिकांश अनुप्रयोगों में, लिबरेज़ पारंपरिक कोलेजनेज़ की जगह लेता है और सेल उपज, सेल व्यवहार्यता और सेल फ़ंक्शन को बढ़ाता है।

सख्त एंजाइम किण्वन और शुद्धिकरण स्थितियों के तहत, लिबरेज़ रिसर्च ग्रेड एंजाइम ब्लेंड्स क्लॉस्ट्रिडिन और ट्रिप्सिन जैसे एंजाइमों को हटा देता है, कच्चे माल से >98% एंडोटॉक्सिन और अन्य मृत कोशिका घटकों को हटा देता है, इस प्रकार संगठन में योगदान देता है। पाचन प्रक्रिया के दौरान, कोशिका व्यवहार्यता काफी बढ़ जाती है। लिबरेज़ श्रृंखला फ़िल्टर-स्टरलाइज़्ड है और इसमें उच्च बैच-टू-बैच स्थिरता है, जो पूरे प्रयोगात्मक चरण में पाचन गुणवत्ता और दोहराव सुनिश्चित करती है।

रोश कोलेजनेज़ और लिबरेज़ श्रृंखला उत्पादों के प्रतिस्थापन की तुलना

सुझावों:

1. लिबरेज़ श्रृंखला के उत्पादों को कोलेजनेज़ और न्यूट्रल प्रोटीज़ के विभिन्न अनुपातों के अनुसार विभिन्न पाचन गतिविधियों वाले पांच प्रकार के उत्पादों में विभाजित किया गया है। आप उपयुक्त उत्पादों के चयन और परिचालन प्रक्रियाओं के संदर्भ के लिए अन्य प्रयोगशाला अध्ययनों या प्रकाशित साहित्य का संदर्भ ले सकते हैं।

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2. नए ऊतक कोशिका पाचन प्रयासों के लिए, लिबरेज़TM के साथ अपना प्रयोग शुरू करने की अनुशंसा की जाती है, जिसमें विभिन्न प्रकार के ऊतकों के लिए अच्छी बहुमुखी प्रतिभा है।

3. लिबरेज़ में कोलेजनेज़ I + II की शुद्धता बहुत अधिक है, और पारंपरिक कोलेजनेज़ पाचन प्रयोगों की तुलना में ऊष्मायन समय आमतौर पर 10 - 30% कम हो जाता है।

कृपया ध्यान दें: लिबरेज़ रिसर्च ग्रेड उत्पाद और अन्य पाचन एंजाइम उत्पाद केवल जीवन विज्ञान अनुसंधान और इन विट्रो अनुसंधान के लिए हैं। इस उत्पाद का उपयोग नैदानिक ​​और नैदानिक ​​प्रक्रियाओं (जैसे मानव आइलेट प्रत्यारोपण) के लिए न करें।

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