मंकी कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) एलिसा किट निर्देश

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इस किट का उपयोग केवल वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए किया जा सकता है, चिकित्सीय निदान के लिए नहीं।

मंकी कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) क्वांटिटेटिव डिटेक्शन किट (एलिसा)

उपयोगकर्ता की मार्गदर्शिका

【मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट नाम】

मंकी कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) क्वांटिटेटिव डिटेक्शन किट (एलिसा)

【मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट किट उपयोग】

सीरम, प्लाज्मा और संबंधित तरल पदार्थों का मात्रात्मक पता लगाना।

[मंकी कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) एलिसा किट का पता लगाने का सिद्धांत]

यह किट डबल-एंटीबॉडी टू-स्टेप सैंडविच एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा) का उपयोग करती है। प्री-कोटेड मंकी कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) मोनोक्लोनल एंटीबॉडी क्लियर एंजाइम लेबल लेपित प्लेट में मानक और परीक्षण नमूना जोड़ें। पर्याप्त समय तक इनक्यूबेट करने के बाद, अनबाउंड घटकों को हटाने के लिए धोएं, और फिर एंजाइम लेबल वर्किंग सॉल्यूशन डालें। पर्याप्त इनक्यूबेशन समय के बाद, अनबाउंड घटकों को हटाने के लिए धोएं। सब्सट्रेट ए और बी को क्रम में जोड़ा जाता है, और सब्सट्रेट (टीएमबी) को हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज (एचआरपी) द्वारा उत्प्रेरित नीले उत्पाद में बदल दिया जाता है, जो एसिड की कार्रवाई के तहत पीला हो जाता है। (कोलेजेनेज़ I) एकाग्रता सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध थी। OD मान 450 एनएम तरंग दैर्ध्य पर मापा गया था। मानक और नमूने के OD मान के आधार पर, नमूने में बंदर कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) सामग्री की गणना की गई थी।

【मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट किट की संरचना】

1

एंजाइम लेपित प्लेट

12 छेद × 8

7

डेवलपर एक तरल

6एमएल

2

मानक

0.3एमएल × 6 ट्यूब

8

डेवलपर बी तरल

6एमएल

3

20 गुना संकेंद्रित वाशिंग तरल

25एमएल

9

समाधान रोकें

6एमएल

4

नमूना मंदक

6एमएल

10

निर्देश

1 सर्विंग

5

विशेष मंदक

6एमएल

11

सीलिंग फिल्म

2 शीट

6

एंजाइम अभिकर्मक

6एमएल

12

सीलबंद बैग

1

[मंकीनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) एलिसा किट के लिए आवश्यक अभिकर्मक और उपकरण नहीं]

1. 37 ℃ थर्मोस्टेट

2. मानक विशिष्टता माइक्रोप्लेट रीडर

3. परिशुद्ध पिपेट और डिस्पोजेबल युक्तियाँ

4. आसुत जल

5. डिस्पोजेबल टेस्ट ट्यूब

6. अवशोषक कागज

【मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट के चरण】

1. तैयारी: रेफ्रिजरेटर से अभिकर्मक किट निकालें और 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर पुनः संतुलित करें।

2. मिश्रण मिश्रण: आसुत जल के साथ 20 गुना सांद्रित धुलाई समाधान को मूल घोल में पतला करें।

3. परीक्षण के लिए मानक उत्पाद और नमूने जोड़ें: पर्याप्त संख्या में एंजाइम-लेपित प्लेटें लें और उन्हें फ्रेम पर लगाएं। मानक कुओं, परीक्षण के लिए नमूना कुओं और खाली नियंत्रण कुओं की स्थापना करें, मानक कुओं में प्रत्येक कुएं की स्थिति रिकॉर्ड करें। मानक उत्पाद का 50μL जोड़ें; पहले परीक्षण के लिए 10μL नमूना जोड़ें, और फिर 40μL नमूना मंदक जोड़ें (अर्थात, नमूना 5 बार पतला किया जाता है); रिक्त नियंत्रण कुआँ नहीं जोड़ा गया है।

4. ऊष्मायन: 37 डिग्री सेल्सियस पानी के स्नान या थर्मोस्टेट में 30 मिनट के लिए ऊष्मायन करें।

5. प्लेट को धोएं: तरल को हटा दें, अवशोषक कागज पर थपथपाकर सुखाएं, प्रत्येक छेद को धोने वाले घोल से भरें, 1 मिनट तक खड़े रहने दें, धोने वाले घोल को हिलाएं, अवशोषक कागज पर थपथपाकर सुखाएं, धोने को 4 बार दोहराएं (आप बोर्ड धोने के निर्देशों को दबाने के लिए वॉशिंग मशीन का भी उपयोग कर सकते हैं)।

6. एंजाइम-लेबल कार्यशील समाधान जोड़ें: खाली नियंत्रण कुओं को जोड़े बिना, प्रत्येक कुएं में 50μL एंजाइम-लेबल कार्यशील समाधान जोड़ें।

7. ऊष्मायन: 37 डिग्री सेल्सियस पानी के स्नान या थर्मोस्टेट में 30 मिनट के लिए ऊष्मायन करें।

8. प्लेट को धोएं: तरल को हटा दें, अवशोषक कागज पर थपथपाकर सुखाएं, प्रत्येक छेद को धोने वाले तरल से भरें, 1 मिनट तक खड़े रहने दें, धोने वाले तरल को हिलाएं, अवशोषक कागज पर थपथपाकर सुखाएं, प्लेट को 4 बार धोने को दोहराएं (बोर्ड धोने के लिए निर्देशों को दबाने के लिए आप वॉशिंग मशीन का भी उपयोग कर सकते हैं)।

9. रंग विकास: प्रत्येक कुएं में 50μL डेवलपर A घोल मिलाएं, और फिर 50μL डेवलपर B घोल मिलाएं, प्लेट मिक्सर के साथ 30 सेकंड तक मिलाएं (या हाथ से 30 सेकंड तक धीरे से हिलाएं), और 15 मिनट के लिए 37 ℃ पर रंग विकसित होने से बचें।

10. समाप्ति: एंजाइम लेबलिंग प्लेट को हटा दें और प्रतिक्रिया को रोकने के लिए प्रत्येक कुएं में 50μL स्टॉप सॉल्यूशन डालें (रंग नीले से पीले रंग में बदल जाता है)

11. निर्धारण: रिक्त छिद्रों को शून्य करें, और समाप्ति के 15 मिनट के भीतर, 450 एनएम की तरंग दैर्ध्य के साथ प्रत्येक कुएं के अवशोषण (ओडी मान) को मापें।

12. गणना: मानक उत्पाद की सांद्रता और संबंधित OD मान के अनुसार, मानक वक्र के रैखिक प्रतिगमन समीकरण की गणना करें, और फिर नमूने के OD मान के अनुसार प्रतिगमन समीकरण पर संबंधित नमूना एकाग्रता की गणना करें। आप गणना के लिए विभिन्न एप्लिकेशन सॉफ़्टवेयर का भी उपयोग कर सकते हैं। अंतिम सांद्रता तनुकरण कारक से गुणा की गई वास्तविक मापी गई सांद्रता है।

[मंकी कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) एलिसा किट के लिए नमूना आवश्यकताएँ]

1. नमूने में सोडियम एजाइड (NaN3) नहीं हो सकता क्योंकि सोडियम एजाइड (NaN3) हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज (HRP) का अवरोधक है।

2. नमूना संग्रह के बाद यथाशीघ्र निकाला जाना चाहिए। निष्कर्षण प्रासंगिक साहित्य के अनुसार किया जाना चाहिए। यदि परीक्षण तुरंत नहीं किया जा सकता है, तो नमूने को -20 ℃ पर संग्रहित किया जा सकता है, लेकिन बार-बार जमने और पिघलने से बचना चाहिए।

3. नमूना हेमोलिसिस और कणों के बिना, पूरी तरह से सेंट्रीफ्यूज किया जाना चाहिए।

【मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट पर नोट्स】

1. प्रयोग निर्देशों के अनुसार कड़ाई से किया जाता है, और प्रयोग का परिणाम माइक्रोप्लेट रीडर की रीडिंग द्वारा निर्धारित किया जाना चाहिए।

2. यदि खोलने के बाद एंजाइम-लेबल लेपित बोर्ड का उपयोग नहीं किया जाता है, तो इसे एक सीलबंद बैग में डाल दिया जाना चाहिए और तुरंत शुष्कक के साथ जोड़ा जाना चाहिए।

3. यह अनुशंसा की जाती है कि सभी मानकों, नमूनों और रिक्त नियंत्रणों का दो प्रतियों में परीक्षण किया जाए, और प्रयोगात्मक त्रुटि को कम करने के लिए औसत मूल्य लिया जाए।

4. ध्यान रखें कि सैंपल को 5 बार पतला किया गया हो. नमूने की वास्तविक सांद्रता प्राप्त करने के लिए गणना परिणाम को 5 से गुणा किया जाता है।

5. इस किट की मात्रात्मक सीमा 6.25-200ng/L है। यदि यह इस सीमा से अधिक है, तो इसकी गणना मानक वक्र के विस्तार से की जाती है। इसका उपयोग सटीक मात्रात्मक परिणामों के लिए नहीं किया जाता है। ), नमूने की अंतिम सांद्रता को कुल तनुकरण कारक से गुणा किया जाता है।

6. यदि रंग बहुत हल्का है, तो सब्सट्रेट ऊष्मायन समय को ठीक से बढ़ाया जा सकता है।

7. क्रॉस-संदूषण से बचने के लिए, प्रत्येक जोड़ के लिए युक्तियों, नमूनों और खाली नियंत्रणों को एक नए से बदला जाना चाहिए; सामान्य घटकों जैसे कि एंजाइम कार्यशील समाधान, नमूना मंदक और सब्सट्रेट को कैंटिलीवर किया जाना चाहिए, और उन्हें माइक्रोवेल्स को नहीं छूना चाहिए। ; सीलिंग फिल्म का पुन: उपयोग न करें।

8. किट का उपयोग वारंटी अवधि के भीतर किया जाता है, और अभिकर्मकों के विभिन्न बैचों को मिश्रित नहीं किया जाना चाहिए।

9. सब्सट्रेट बी प्रकाश के प्रति संवेदनशील है और लंबे समय तक प्रकाश के संपर्क में रहने से बचता है।

[मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट की संचालन प्रक्रिया का सारांश]

अभिकर्मक, नमूने और मानक तैयार करें

तैयार नमूने और मानक जोड़ें, और 30 मिनट के लिए 37 ℃ पर प्रतिक्रिया करें

प्लेट को 4 बार धोएं, एंजाइम अभिकर्मक जोड़ें, और 30 मिनट के लिए 37 ℃ पर प्रतिक्रिया करें

प्लेट को 4 बार धोएं, रंग विकसित करने वाले घोल ए और बी डालें और 15 मिनट के लिए 37 ℃ पर विकसित करें

स्टॉप समाधान जोड़ें

15 मिनट के भीतर OD मान पढ़ें

गणना

[मंकी कोलेजनेज़ I (कोलेजेनेज़ I) एलिसा किट डिटेक्शन रेंज]

कृपया पूछताछ करें

【मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट की विशिष्टता】

96 सर्विंग्स/बॉक्स 48 सर्विंग्स/बॉक्स

[मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट का भंडारण]

प्रकाश और नमी से सुरक्षित 2-8 ℃ पर स्टोर करें।

【मंकी कोलेजनेज़ I एलिसा किट की वैधता】

6 महीने